小鼠抗IgG單克隆抗體的制備方法
小鼠抗IgG單克隆抗體在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域中顯示了極大的應(yīng)用價(jià)值，是親和層析中重要的配體，是免疫組化中主要的抗體，是免疫檢驗(yàn)中的新型試劑，是生物治療的導(dǎo)向武器。作為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)試劑，可以充分發(fā)揮其優(yōu)勢(shì)。單克隆抗體的特異性強(qiáng)，可將抗原抗體反應(yīng)的特異性大大提高，減少了可能的交叉反應(yīng)，使試驗(yàn)結(jié)果可信度更大。單克隆抗體的均一性和生物活性單一性使抗原抗體反應(yīng)結(jié)果便于質(zhì)量控制，利于標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化。
小鼠抗IgG單克隆抗體即單個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所分泌的抗體。抗體主要由機(jī)體的B淋巴細(xì)胞合成，每個(gè)B淋巴細(xì)胞有合成一種抗體的遺傳基因。當(dāng)機(jī)體受抗原刺激時(shí)，抗原分子上的許多決定簇分別激活各個(gè)具有不同基因的B細(xì)胞。被激活的B細(xì)胞分裂增殖形成該細(xì)胞的子孫，即克隆。如果選出一個(gè)合成一種抗體的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，就。單克隆抗體是單個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆后產(chǎn)生的專(zhuān)門(mén)針對(duì)一種抗原決定簇的抗體單克隆抗體是單個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆后產(chǎn)生的專(zhuān)門(mén)針對(duì)一種抗原決定簇的抗體單克隆細(xì)胞合成的針對(duì)一種抗原決定簇的抗體稱(chēng)為單克隆抗體。小鼠抗IgG單克隆抗體可以檢測(cè)出多種病毒中非常細(xì)微的株間差異，鑒定細(xì)菌的種型和亞種。
小鼠抗IgG單克隆抗體的制備是以細(xì)胞融合并培養(yǎng)為原理進(jìn)行的，它是一種抗體，是一種克隆化的細(xì)胞株，能夠穩(wěn)定的分泌特定的單克隆抗體。克隆有多種含義，克隆的定義1：一個(gè)共同前體通過(guò)無(wú)性繁殖而形成的一群基因結(jié)構(gòu)相同的細(xì)胞或個(gè)體。對(duì)于基因克隆，則指一個(gè)基因反復(fù)擴(kuò)增后產(chǎn)生的多個(gè)拷貝。定義2：來(lái)自同一個(gè)祖先、經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖所產(chǎn)生相同的分子。
單克隆抗體制備有兩種方法：
一種方法是：增量培養(yǎng)法，即將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)，在培養(yǎng)液中分離單克隆抗體。該法需用特殊的儀器設(shè)備，一般應(yīng)用無(wú)血清培養(yǎng)基，以利于單克隆抗體的濃縮和純化。
二也是普遍采用的方法是小鼠腹腔接種法。選用BALB/c小鼠或其親代小鼠，先用降植烷或液體石蠟行小鼠腹腔注射，一周后將雜交瘤細(xì)胞接種到小鼠。小鼠抗IgG單克隆抗體直接在體外培養(yǎng)都可以。
