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寵物獸醫(yī)ELISA檢測工作要注意這幾點(diǎn)
   寵物獸醫(yī)ELISA檢測工作要注意這幾點(diǎn)
  寵物獸醫(yī)ELISA檢測作為一種在獸醫(yī)診斷領(lǐng)域新興的檢測技術(shù),因其*的優(yōu)勢受到了越來越多的關(guān)注,也將會獸醫(yī)體外診斷技術(shù)發(fā)展的潮流。這種采用抗原-抗體結(jié)合原理建立的各種檢測方法在臨床上廣泛應(yīng)用,不僅用于檢測各種腫瘤標(biāo)記物、自身抗體,還可以用于檢測感染性疾病標(biāo)志物和激素等。
  目前,該診斷技術(shù)以其具有的靈敏度高、特異性強(qiáng)、簡便快速、可進(jìn)行定性、定量檢測等優(yōu)勢,已廣泛應(yīng)用于感染性疾?。ò?xì)菌性感染、病毒性感染、寄生蟲、真菌、人畜共患疾病等)、腫瘤等多個領(lǐng)域。其檢測結(jié)果對臨床醫(yī)療決策的貢獻(xiàn)度進(jìn)一步提升,檢驗(yàn)結(jié)果的重要性也達(dá)到*的高度。
  在獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室中,寵物獸醫(yī)ELISA檢測工作的核心問題就在于操作的精準(zhǔn)性,所以必須在血樣采取與處理、回溫、加樣、孵育、洗滌、顯色和保護(hù)工作中對其檢測的質(zhì)量進(jìn)行控制,才能更好地促進(jìn)這一工作的重要性彰顯。實(shí)驗(yàn)時需要注意的這些地方:
  (1)在血樣采取與處理過程中應(yīng)確保采樣輕柔,預(yù)防出現(xiàn)溶血的情況,這主要是由于紅細(xì)胞在溶解過程中所釋放的物質(zhì)中具有過氧化物酶活性的特點(diǎn),進(jìn)而對檢測結(jié)果帶來影響。而且標(biāo)本存儲的時間較長就會導(dǎo)致LGG聚合為多聚體,進(jìn)而出現(xiàn)本底過深和假陽性的出現(xiàn),所以需要及時對血清樣板進(jìn)行測定,并將其放在4℃的保溫箱中。若測定的時間超過3天,應(yīng)將其低溫冰存。
 ?。?)在回溫過程中應(yīng)盡可能地采取低溫,一般回溫溫度只要確保洗滌液的結(jié)晶在充分搖動的情況下可以*溶解即可。
  (3)在加樣過程中,由于其涉及的環(huán)節(jié)較多,所以在采用微量加樣器時,應(yīng)嚴(yán)格按照規(guī)定的加入量,將其加入到板孔之中,而且在加樣過程中應(yīng)確保加入的樣品處于板孔的底部。這樣就能有效預(yù)防在孔壁上存在的樣品,預(yù)防樣品濺出的同時還要避免其出現(xiàn)氣泡。
  (4)在孵育過程中,由于其在寵物獸醫(yī)ELISA檢測中需要一定的時間,所以其在這一過程中始終處于恒溫狀態(tài),具體的做法就是在恒溫箱中放置ELISA板。同時還要利用封板條將反應(yīng)孔封住,嚴(yán)禁將反應(yīng)板疊放,這樣就能夠有效地預(yù)防其蒸發(fā),同時又能夠確保每個反應(yīng)板的溫度快速平衡,盡可能地確保溫育溫度與溫育時間的精準(zhǔn)性。
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