寵物獸醫(yī)ELISA檢測工作要注意這幾點
寵物獸醫(yī)ELISA檢測作為一種在獸醫(yī)診斷領域新興的檢測技術,因其*的優(yōu)勢受到了越來越多的關注,也將會獸醫(yī)體外診斷技術發(fā)展的潮流。這種采用抗原-抗體結合原理建立的各種檢測方法在臨床上廣泛應用,不僅用于檢測各種腫瘤標記物、自身抗體,還可以用于檢測感染性疾病標志物和激素等。
目前,該診斷技術以其具有的靈敏度高、特異性強、簡便快速、可進行定性、定量檢測等優(yōu)勢,已廣泛應用于感染性疾?。ò毦愿腥?、病毒性感染、寄生蟲、真菌、人畜共患疾病等)、腫瘤等多個領域。其檢測結果對臨床醫(yī)療決策的貢獻度進一步提升,檢驗結果的重要性也達到*的高度。
在獸醫(yī)實驗室中,寵物獸醫(yī)ELISA檢測工作的核心問題就在于操作的精準性,所以必須在血樣采取與處理、回溫、加樣、孵育、洗滌、顯色和保護工作中對其檢測的質量進行控制,才能更好地促進這一工作的重要性彰顯。實驗時需要注意的這些地方:
?。?)在血樣采取與處理過程中應確保采樣輕柔,預防出現溶血的情況,這主要是由于紅細胞在溶解過程中所釋放的物質中具有過氧化物酶活性的特點,進而對檢測結果帶來影響。而且標本存儲的時間較長就會導致LGG聚合為多聚體,進而出現本底過深和假陽性的出現,所以需要及時對血清樣板進行測定,并將其放在4℃的保溫箱中。若測定的時間超過3天,應將其低溫冰存。
(2)在回溫過程中應盡可能地采取低溫,一般回溫溫度只要確保洗滌液的結晶在充分搖動的情況下可以*溶解即可。
?。?)在加樣過程中,由于其涉及的環(huán)節(jié)較多,所以在采用微量加樣器時,應嚴格按照規(guī)定的加入量,將其加入到板孔之中,而且在加樣過程中應確保加入的樣品處于板孔的底部。這樣就能有效預防在孔壁上存在的樣品,預防樣品濺出的同時還要避免其出現氣泡。
?。?)在孵育過程中,由于其在寵物獸醫(yī)ELISA檢測中需要一定的時間,所以其在這一過程中始終處于恒溫狀態(tài),具體的做法就是在恒溫箱中放置ELISA板。同時還要利用封板條將反應孔封住,嚴禁將反應板疊放,這樣就能夠有效地預防其蒸發(fā),同時又能夠確保每個反應板的溫度快速平衡,盡可能地確保溫育溫度與溫育時間的精準性。