神經絲輕鏈蛋白檢測試劑盒使用酶免法定量檢測人腦脊液中的神經絲輕鏈（NF-light）。該實驗使用兩種高特異性的非競爭性單克隆抗體。主要的細胞骨架成分。對于保持軸突口徑和形態(tài)的完整十分重要，影響著神經傳輸的速率和準確性。存在著三種不同的神經絲鏈，根據其大小而定義，分別為神經絲輕鏈、神經絲中鏈和神經絲重鏈。
神經絲輕鏈組成了重鏈的骨架，重鏈聚集形成了神經絲纖維。由于直接的創(chuàng)傷或者緩慢的退化過程，受損的神經細胞內容物釋放至周邊的隔室，所以可以定量檢測軸突蛋白。升高的神經絲輕鏈水平已發(fā)現在各類退行性疾病中，例如肌萎縮性[脊髓]側索硬化、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化和在動物模型中的慢性實驗性自身免疫性腦脊髓炎。
神經絲輕鏈蛋白檢測試劑盒利用ELISA夾心法原理。一種特異性單克隆抗體包被在固相表面并連接神經絲。通過使用另一種酶標記的單克隆抗體進行檢測。通過酶促反應使無色的底物液轉化為有色產物，顏色的強度與樣本中神經絲含量成正比。
神經絲輕鏈蛋白（NF-light）檢測步驟
注意：酶標板每次洗滌后應在吸水紙上拍干。板子放在800rpm的定軌振蕩器上振蕩是很重要的
1、使用樣本稀釋緩沖液按1:1稀釋CSF樣本，得到總體積小為210?l（做雙孔時所需的量）。
根據標準品稀釋表，進行標準品的重溶和稀釋。
2、使用洗滌緩沖液洗滌包被板（3次，每次300/l）。加入的洗滌液應吸出或者通過在吸水紙上拍干清除。
3、 加入準備好標準品、樣本各100/l，進行雙孔檢測。于振蕩器（800 rpm）中室溫（20-25）下溫育1小時。
4、使用洗滌緩沖液洗滌包被板（3次，每次300/l），見步驟2。
5、每孔加入100?l新鮮配制的標記物（生物素化的抗NFL 抗體）。于振蕩器（800 rpm）中室溫（20-25）下溫育45分鐘。
6、使用洗滌緩沖液洗滌包被板（3次，每次300/l），見步驟2。
7、每孔加入100/l新鮮配制酶聯物（HRP標記的鏈霉親和素）。于振蕩器（800 rpm）中室溫（20-25）下溫育30分鐘。
8、使用洗滌緩沖液洗滌包被板（3次，每次300/l），見步驟2。
9、每孔加入100/l TMB。于振蕩器（800 rpm）中室溫（20-25）下溫育15分鐘。
10、每孔加入50/l的終止液，并在450nm處（參考波長620-650 nm）讀數。注意：終止液含稀釋的硫酸具有腐蝕性。神經絲輕鏈蛋白（NF-light）
