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公司名稱:深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司
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NSE ELISA試劑盒
NSE ELISA試劑盒
德國(guó)DRG*,貨號(hào):EIA4424
德國(guó)DRG中國(guó)*代理商“深圳科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司”竭誠(chéng)為您服務(wù)
 
預(yù)期用途
此試劑盒僅用于研究,不能用于診斷
實(shí)驗(yàn)原理
此試劑盒采用的是酶免法,樣品,標(biāo)準(zhǔn)品,質(zhì)控品和生物素標(biāo)記的抗NSE抗體在微孔內(nèi)孵育,孵育期間,特異性NSE與包被抗NSE抗體結(jié)合,未結(jié)合的NSE抗原被洗去,酶聯(lián)物加入每孔,孵育,未結(jié)合的酶聯(lián)物被洗去,結(jié)合的酶聯(lián)物的量與樣品中NSE的量成正比,加入底物液后,藍(lán)色強(qiáng)度與樣品中的NSE抗原的濃度成正比。
注意事項(xiàng)及預(yù)防措施
1.       試劑盒內(nèi)的成分完整,不同批次的成分不能混用
2.       潛在生物危害的材料:陰性和陽(yáng)性質(zhì)控基質(zhì)是人血清,標(biāo)準(zhǔn)品血清對(duì)HIV,HbsAg和HCV都表現(xiàn)為陰性,但是試劑中會(huì)出現(xiàn)此類(lèi)病毒(HIV/II,HbsAg和HCV)或其他具有感染性的病原體的可能性都不能*被排除。因此,依據(jù)CDC/美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究手冊(cè)“微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全”,建議試劑應(yīng)視為2級(jí)生物安全處理
貯存及穩(wěn)定性
1.       試劑盒保存在2-8℃,微孔板裝在含有干燥劑的密封袋內(nèi)
2.       試劑盒直至有效期
3.       TMB底物液是無(wú)色的,如果溶液變藍(lán),則應(yīng)替換,貯存和使用過(guò)程中不要將試劑暴露在強(qiáng)光下
試劑盒組成
1.       微孔板,96T,鏈霉親和素包被
2.       酶聯(lián)物和抗體液,11ml,HRP標(biāo)記的抗NSE抗體和生物素標(biāo)記的抗體液
3.       標(biāo)準(zhǔn)品,0.5ml/支,濃度范圍:5,25,50,100,200ug/ml,分裝凍存,標(biāo)準(zhǔn)品在室溫下不穩(wěn)定
4.       高和低質(zhì)控,0.5ml/支,參考值見(jiàn)標(biāo)簽,分裝凍存,質(zhì)控品在室溫下不穩(wěn)定
5.       樣品稀釋液或零標(biāo)準(zhǔn)品,11ml,
6.       TMB底物液,11ml,緩沖液內(nèi)含有過(guò)氧化氫和Tetramethylbenzidine
7.       洗滌緩沖濃縮液,10ml,100X,10ml的濃縮液+990ml的去離子水混勻即得工作洗滌緩沖液
8.       終止液,2N 鹽酸
9.       固定板,用于固定板條
實(shí)驗(yàn)所需材料但試劑盒未提供
1.       酶標(biāo)儀
2.       移液器  體積:25,100ul
3.       1L的洗滌瓶
樣品采集和處理
靜脈穿刺采集全血,自然凝集,室溫下離心分離出血清,貯存于無(wú)菌管內(nèi)
延長(zhǎng)全血的貯存可能會(huì)導(dǎo)致血細(xì)胞釋放NSE
如果血清不立即檢測(cè)的話,可在2-8℃下保存1天或是-20℃下保存30天
樣品不能反復(fù)凍融,不要將樣品放置在自動(dòng)除霜冰箱內(nèi)
不要使用脂血和溶血樣品
不建議采用血漿做實(shí)驗(yàn),因?yàn)檠“鍟?huì)釋放NSE
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
1.       實(shí)驗(yàn)前,將所有樣品,試劑平衡至室溫,混勻
2.       實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前將所有試劑準(zhǔn)備好,實(shí)驗(yàn)一旦開(kāi)始,就要無(wú)中斷的完成,以得到zui可靠和一致的結(jié)果
3.       每次取樣都用新的槍頭吸取
實(shí)驗(yàn)步驟
1.       將實(shí)驗(yàn)所需板條固定好,做好樣品標(biāo)記
2.       吸取25ul的標(biāo)準(zhǔn)品,質(zhì)控品和樣品于相應(yīng)的孔內(nèi)
3.       每孔加入100ul的酶聯(lián)物和抗體液
4.       室溫下孵育60min
5.       棄去孵育液,每孔加入300ul洗滌緩沖液洗板5次
6.       每孔加入100ul的TMB底物液
7.       室溫下孵育30min
8.       每孔加入50ul的終止液,酶標(biāo)儀讀數(shù)
操作注意事項(xiàng)
1.       洗板,孔內(nèi)水滴要*清除
2.       所有樣品和試劑都要加入至孔底部,漩渦混合或振蕩不要求
3.       吸收值是孵育時(shí)間和溫度的函數(shù),建議試劑和樣品加樣的時(shí)間間隔一致,無(wú)中斷
4.       基于同樣的原因,樣品數(shù)不超過(guò)20個(gè)的,標(biāo)準(zhǔn)品設(shè)置雙份檢測(cè)
5.       血清樣品中NSE濃度高于200ug/L時(shí),則需進(jìn)一步稀釋?zhuān)匦聶z測(cè)
結(jié)果計(jì)算
1.       標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為X軸,吸收值為Y軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
2.       按以下參考標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品NSE值(以下數(shù)據(jù)僅供參考,不能用于本次試驗(yàn)的結(jié)果計(jì)算)
 
 
 
附:采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測(cè),只需檢測(cè)前設(shè)置好酶標(biāo)儀的相關(guān)參數(shù),如坐標(biāo)參數(shù)(線性,半對(duì)數(shù))和計(jì)算方式參數(shù)(三次回歸、四參數(shù)或雙對(duì)數(shù)曲線方程),即可直接得到結(jié)果
 
 
本譯文僅供參考,詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。
 
 
 
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