不少人可能會(huì)好奇：為什么核酸檢測(cè)不能直接用棉簽蘸唾液來(lái)唾液檢測(cè)呢？原因有兩點(diǎn)： 1.唾液里的病毒量少 病毒一般是定植在呼吸道里，隨著呼吸道分泌物向外排出的，因此越靠近咽喉里面，病毒會(huì)分布得越多。唾液中的病毒比咽部表皮上要少，檢測(cè)的敏感度可能會(huì)降低。
2.唾液需要經(jīng)過(guò)液化處理 唾液本身比較黏稠，不能直接拿來(lái)檢測(cè)，需要先進(jìn)行液化處理。全國(guó)每天有大量核酸樣本要檢測(cè)，如果每份都要液化，無(wú)疑就會(huì)大大增加檢測(cè)時(shí)間。
目前唾液的檢測(cè)的樣本采集比較方便，處理也比較簡(jiǎn)單，可檢測(cè)的用途也越來(lái)越廣了。本文介紹的唾液鐵調(diào)素檢測(cè)試劑盒采用的是ELISA方法，該方法操作簡(jiǎn)單方便，擁有靈敏度高特異性強(qiáng)的特點(diǎn)，檢測(cè)時(shí)間短，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，目前ELISA方法已經(jīng)在普遍運(yùn)用。
檢測(cè)原理
唾液鐵調(diào)素檢測(cè)試劑盒采用的競(jìng)爭(zhēng)法。微量滴定孔用針對(duì)鐵調(diào)素分子抗原位點(diǎn)的單克隆（小鼠）抗體包被?；颊邩悠分械膬?nèi)源性鐵調(diào)素與鐵調(diào)素-生物素結(jié)合物（酶結(jié)合物）競(jìng)爭(zhēng)與被包被抗體的結(jié)合。溫育后，洗滌微量滴定板以終止競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)。
在隨后的溫育中，結(jié)合的生物素分子用鏈霉親和素過(guò)氧化物酶（酶復(fù)合物）檢測(cè)。溫育后，將板再次洗滌。添加底物溶液后，顯色的強(qiáng)度與患者樣品中鐵調(diào)素的濃度成反比。
檢測(cè)步驟
每次運(yùn)行必須包含一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1、在框架固定器中固定所需數(shù)量的微量滴定孔。
2、用新的一次性吸頭分配100 ?L的每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品，質(zhì)控品和樣品（上清液）到適當(dāng)?shù)目字小?/span>
3、在每個(gè)孔中分配100 ?L酶聯(lián)物。*混合10秒鐘。在此步驟中進(jìn)行充分混合非常重要。
4、在室溫下孵育60分鐘。
5、輕搖孔中的內(nèi)容物。每孔用400 ?L稀釋的洗滌溶液沖洗孔4次（如果使用了平板清洗機(jī)）-或-每孔用300 ?L稀釋的洗滌溶液沖洗孔4次以進(jìn)行手動(dòng)洗滌。在吸收紙上劇烈打孔以去除殘留的液滴。重要的提示：正確執(zhí)行洗滌程序會(huì)明顯影響該測(cè)定的靈敏度和精確度！
6、將100 ?L酶復(fù)合物分配到每個(gè)孔中。
7、在室溫下孵育30分鐘。
8、輕搖孔中的內(nèi)容物。每孔用400 ?L稀釋的洗滌溶液沖洗孔4次（如果使用了平板清洗機(jī)）-或-每孔用300 ?L稀釋的洗滌溶液沖洗孔4次以進(jìn)行手動(dòng)洗滌。在吸收紙上劇烈打孔以去除殘留的液滴。
9、向每個(gè)孔中添加100 ?L底物溶液。
10、在室溫下孵育15分鐘。
11、通過(guò)向每個(gè)孔中添加100 ?L終止液來(lái)終止酶促反應(yīng)。
12、用微量滴定板讀數(shù)器測(cè)定每個(gè)孔在450±10 nm處的吸光度（OD）。建議在添加終止液后10分鐘內(nèi)讀取孔。
