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白喉棒狀桿菌毒素ELISA檢測(cè)試劑盒

棒狀桿菌是一種不規(guī)則形狀的需氧非芽孢形成的革蘭氏陽(yáng)性桿狀體(0.5-1µm厚，長(zhǎng)2-6µm)。它們包括皮膚共生體、機(jī)會(huì)病原體和幾種主要病原體，包括白喉棒狀桿菌。一般來(lái)說(shuō)，它們是從含有亞碲酸鹽的選擇性培養(yǎng)基上的咽拭子中分離出來(lái)的。由白喉梭菌引起的細(xì)菌感染有兩種形式。呼吸性白喉通常是由產(chǎn)毒素（產(chǎn)毒）毒株引起的；皮膚疾病可由產(chǎn)毒或非產(chǎn)毒菌株引起。在呼吸道形式的疾病中，形成一種膜；這種膜通常在喉部或扁桃體上可見(jiàn)。當(dāng)細(xì)胞膜阻塞呼吸時(shí)，人可能會(huì)死于窒息。其他并發(fā)癥是由白喉毒素（心肌炎，神經(jīng)麻痹）的遠(yuǎn)程作用引起的。皮膚白喉通常是輕微的，通常由非明顯的潰瘍或淺層潰瘍組成，很少涉及毒性并發(fā)癥（1-2%的產(chǎn)毒菌株感染）。白喉是疫苗接種前時(shí)期兒童死亡的最常見(jiàn)原因之一。自從大多數(shù)工業(yè)化國(guó)家引進(jìn)白喉類(lèi)毒素疫苗（福爾馬林滅活白喉毒素）并廣泛使用以來(lái)，這種疾病現(xiàn)在的特點(diǎn)是散發(fā)病例和低強(qiáng)度的間歇性暴發(fā)。但是，最近在一些東歐國(guó)家的白喉流行再次引起人們對(duì)這種被遺忘的“疾病"的注意，而且，這些病例大多數(shù)發(fā)生在青少年和成人中，而不是兒童?？刂瓢缀淼挠行Х椒ㄊ峭ㄟ^(guò)預(yù)防性的白喉類(lèi)毒素免疫。類(lèi)毒素抗體可防止毒素的作用；經(jīng)免疫接種的人可被產(chǎn)生毒素的白喉菌株感染，但不會(huì)出現(xiàn)白喉的系統(tǒng)性表現(xiàn)。通過(guò)早期、適當(dāng)?shù)闹委煟梢愿纳萍膊〉慕Y(jié)果。及時(shí)識(shí)別該疾病對(duì)于確保早期、適當(dāng)?shù)陌缀砜苟舅刂委熀苤匾?/span>。

【檢測(cè)原理】

特異性抗體的定量免疫酶學(xué)測(cè)定是基于ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）技術(shù)。微孔板上包被特定的抗原，以結(jié)合樣本的相應(yīng)抗體。洗滌微孔以去除所有未結(jié)合的樣本材料后，添加酶聯(lián)物，與捕獲的抗體結(jié)合。在第二個(gè)洗滌步驟中，未結(jié)合的共軛物被去除。通過(guò)加入四甲基聯(lián)苯胺(TMB)底物，得到藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物，可以觀(guān)察到結(jié)合結(jié)合物形成的免疫復(fù)合物。該產(chǎn)品的強(qiáng)度與樣本中特異性抗體的數(shù)量成正比。加入終止液以終止反應(yīng)，藍(lán)色變成了黃色。使用酶標(biāo)儀器讀取450/620nm處的吸光度。

【試劑盒組成】

1）微孔板              12x8，包被白喉棒狀桿菌毒素（類(lèi)毒素）抗原

2）樣本稀釋液          1×100ml，磷酸鹽緩沖液（10mM），pH 7.2 ± 0.2，即用型

3）終止液              1×15ml，硫酸，0.2mol/L，即用型

4）洗滌濃縮液          20倍濃縮，磷酸鹽緩沖液（0.2M），1×50ml，pH 7.2 ± 0.2

5）酶聯(lián)物              1×20ml，過(guò)氧化物酶標(biāo)記的人IgG抗體，即用型

6）底物液              1×15ml，3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺（TMB），即用型

7）標(biāo)準(zhǔn)品       4x2ml，即用型（標(biāo)準(zhǔn)品按照“第一個(gè)白喉抗毒素人體IgG國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)"進(jìn)行校準(zhǔn)）

標(biāo)準(zhǔn)品A           0.000 IU/mL   藍(lán)蓋

標(biāo)準(zhǔn)品B           0.015 IU/mL   綠蓋

標(biāo)準(zhǔn)品C           0.075 IU/mL   黃蓋

標(biāo)準(zhǔn)品D           0.150 IU/mL   紅蓋

8）封板紙             1x

9）使用說(shuō)明書(shū)         1x

【所需的材料和設(shè)備】（未提供）

1）酶標(biāo)儀

2）37℃培養(yǎng)箱

3）手動(dòng)或自動(dòng)洗板裝置

4）移液器：10-1000µL

5）渦旋混合器

6）蒸餾水

7）一次性試管

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