孕烯醇酮Pregnenolone檢測試劑盒
編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 時間 | 標準品范圍 | 單價 | 備注 |
DB52031 | Pregnenolone 孕烯醇酮 | 96T | 60/15/min | 0.1-25.6ng/ml0.05ng/ml | 詢價 | 德國IBL |
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱:孕烯醇酮檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名稱:Pregnenolone ELISA
【產(chǎn)品規(guī)格】
96T
【預(yù)期用途】
孕烯醇酮(Pregnenolone)激素檢測試劑盒可用于人血清中孕烯醇酮的定量檢測。
【前言簡介】
孕烯醇酮(3β-羥基-孕甾-5-烯-20-酮)是膽固醇的類固醇生成途徑產(chǎn)生的第一種類固醇,且是所有腎上腺和性腺類固醇的共同前體。它是通過在線粒體上的膽固醇經(jīng)膽固醇側(cè)鏈裂解酶催化作用產(chǎn)生的。一旦生成,孕烯醇酮將就會被兩種類固醇生成途徑所利用。孕烯醇酮可通過17α-羥化酶的作用轉(zhuǎn)換成17-羥孕烯醇酮或者通過3β-羥基類固醇脫氫酶的作用轉(zhuǎn)換成孕酮。
在先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥(CAH)中,由于3β-羥基類固醇脫氫酶或17α-羥化酶的缺乏,導(dǎo)致孕烯醇酮水平的升高。高水平的孕烯醇酮也發(fā)生在女性特發(fā)性多毛癥中。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),孕烯醇酮的水平在性別和年齡方面差異明顯,在最大水平一般發(fā)生在17歲女性和16歲男性中,然而低水平一般體現(xiàn)在37歲女性和38歲男性中。總的來說,女性體內(nèi)的孕烯醇酮一般略高于男性。孕烯醇酮的生理機能的許多領(lǐng)域仍有待調(diào)查。目前有研究表明檢測血清中的孕烯醇酮有助于研究其代謝產(chǎn)物、硫化孕烯醇酮在哺乳動物的大腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的各種影響。
【檢測原理】
此孕烯醇酮(Pregnenolone)激素檢測試劑盒采用的是典型的競爭法。未標記的抗原(存在于標準品、質(zhì)控品和樣品中)和一定量的酶標抗原競爭結(jié)合微孔板上有限的抗體結(jié)合位點。溫育,洗板,加入底物液進行顏色反應(yīng),樣品中抗原的量與顏色強度成反比,結(jié)果可直接從標準曲線上得到。
【主要組成成分】
微孔板 12×8孔,包被了抗孕烯醇酮多克隆抗體。
酶聯(lián)物(50×) 300μL,1支,內(nèi)含HRP標記的孕烯醇酮,蛋白緩沖液,無汞防腐劑
標準品A 2ml,1支,即用,內(nèi)含孕烯醇酮,蛋白緩沖液,無汞防腐劑
標準品B-F 1ml,5支,即用,內(nèi)含孕烯醇酮,蛋白緩沖液,無汞防腐劑。
質(zhì)控品 1ml,2支,即用,內(nèi)含孕烯醇酮,蛋白緩沖液,無汞防腐劑.范圍見標簽或質(zhì)控單
洗滌液(10×) 50ml,1瓶,無離子洗滌劑的緩沖液和無汞防腐劑
分析緩沖液 17ml,1瓶,蛋白緩沖液,無汞防腐劑
TMB底物液 18ml,1瓶,內(nèi)含TMB過氧化氫,不含DMF或DMSO的緩沖液
終止液 8ml,1瓶,1M硫酸
所需材料(未提供)
1) 移液器,50;100;150和300μl
2) 蒸餾水或去離子水
3) 8通道移液器
4) 定軌搖床(600rpm)或直線搖床(200rpm)
5) 酶標儀
6) 吸水紙,槍頭和計時器
【儲存條件】
試劑盒于2~8℃下可儲存至標簽上的效期。
【樣本要求】
雙孔實驗至少需要0.2ml的血清樣本。至少要采集4-5ml的血液,待凝血完成后離心取出血清進行實驗。如不能立即進行實驗的,4℃條件下可儲存24小時,-10℃或更低溫度條件下可儲存稍長時間。
【檢測方法】
檢測開始前,將所有試劑平衡至室溫 。標準品、質(zhì)控品和樣品均做雙孔。
標準品、質(zhì)控品
標準品、質(zhì)控品一旦打開,必須在14天內(nèi)使用或者分裝凍存起來,避免反復(fù)凍融。
酶聯(lián)物
按1:50進行稀釋,如:40 μL酶聯(lián)物 + 2ml分析緩沖液?,F(xiàn)配現(xiàn)用
洗滌液
按1:10的比例用蒸餾水進行稀釋。
檢測步驟
1)標準品,質(zhì)控品和樣品吸取50μL至相應(yīng)孔內(nèi)
2)每孔加入100μL現(xiàn)配的酶聯(lián)液
3)室溫(18-25℃)下震蕩溫育1h
4)每孔加入300μL的洗滌緩沖液洗板3次,倒去孔內(nèi)液體,吸水紙上拍干(建議使用洗板機洗板)
5)如果條件允許,建議加底物液和終止液時使用8通道移液器。
6)每孔加入150μL的TMB底物液
7)室溫下振蕩溫育10-15min(或是直到標準品A變成深藍色)
8)按照步驟6)的加樣順序相同的間隔時間,每孔加入50μL的終止液,輕輕晃蕩微孔板使其混勻
9)加入終止液后20min內(nèi)在酶標儀450nm處測定OD值
*如果OD值超過450nm濾光片的檢測上限,我們可用405nm或415nm代替,OD值可能會比較低,但它并不會影響樣品和質(zhì)控品的實驗結(jié)果。
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