多巴胺(Dopamine)ELISA檢測試劑盒
編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 單價 | 方法 | 備注 |
RE59161 | Dopamine 多巴胺 | 96T | 詢價 | ELISA | 德國IBL |
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱:多巴胺ELISA試劑盒
英文名稱:dopamine ELISA
【產(chǎn)品規(guī)格】
96T
【預(yù)期用途】
此多巴胺檢測試劑盒可用于人血漿和尿液中多巴胺的體外定量檢測,可手動操作,也可自動操作。進(jìn)一步的研究表明:此試劑盒還可用于組織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液的研究。
【前言簡介】
兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織,并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中,兒茶酚胺激素及其代謝產(chǎn)物間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加,因而這些激素可用于疾病的診斷。所以,這些激素的檢測對于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷,當(dāng)然也用于成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤的診斷。
因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)一開始時有提取步驟,所以用戶可使用所有動物材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。此試劑盒還可檢測大鼠、小鼠或其它動物的樣本。
【檢測原理】
此多巴胺檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)是固相酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)利用的是ELISA的夾心法。微孔中包被了羊抗兔抗體。在溫育時間之內(nèi),加入的抗體可直接與抗原分子上的一個表位結(jié)合。樣品中的抗原與酶標(biāo)二抗(可與抗原分子上的不同表位結(jié)合)在包被孔中溫育。加入底物液后,溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接用標(biāo)準(zhǔn)曲線確定。
【貯存與穩(wěn)定性】
試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃,避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定,前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。
檢測尿液和血漿中的多巴胺
注意:提取的標(biāo)準(zhǔn)品,質(zhì)控品和病人尿液樣本加入微孔板內(nèi)之前需進(jìn)行稀釋
1 | 在一次性試管內(nèi),用釋放緩沖液以1:51的比例稀釋提取的標(biāo)準(zhǔn)品,質(zhì)控品和尿液樣本(如:10ul提取樣本+500ul的釋放緩沖液) |
2 | 在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的COMT酶溶液,輕輕振蕩。 |
3 | 將預(yù)稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品,質(zhì)控品和尿液樣本加100ul至相應(yīng)孔內(nèi),血漿樣本直接加100ul于相應(yīng)孔內(nèi)。 在此步驟中,將槍頭直接觸碰COMT酶溶液,顏色會轉(zhuǎn)為粉紅色,輕輕混勻。 |
3 | 在每一微孔中加入50ul多巴胺抗血清(紫色)。 |
4 | 蓋板,在振蕩器(400-600rpm)上室溫(18-25℃)溫育120min。 |
5 | 移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。 |
6 | 在每一微孔中加入100ul臨時配置好的酶聯(lián)物。 |
7 | 蓋板,在振蕩器(400-600rpm)上室溫(18-25℃)溫育60min |
8 | 移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。 |
9 | 如果可以的話,使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應(yīng)當(dāng)相同,使用自動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。 |
10 | 在每一微孔中加入200ul底物液。 |
11 | 在振蕩器(400-600rpm)上室溫(18-25℃)溫育40min |
12 | 在每一微孔中加入50ul PNPP終止液,輕輕振板以使溶液混合均勻。 |
13 | 加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。(參考波長:620-650nm) |
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